APLICAÇÃO DE BIOTECNOLOGIA NA PRODUÇÃO IN VITRO DE METABÓLITOS DO ANTI-HIPERTENSIVO LASSBIO 897

Resumo

Introdução e objetivos: A biotransformação, utilizando-se modelos microbianos, tem sido usada para elucidação do metabolismo de fármacos e posterior preparação in vitro de metabólitos. O composto LASSBio 897(um derivado N-acilidrazônico, o 3,4-metilenodioxbenzoil-3-tienilidrazona) foi sintetizado no Laboratório de Avaliação e Síntese de Substâncias Bioativas (LASSBio) da UFRJ. Devido potente atividade vasodilatadora, o LASSBio 897, é um promissor candidato a protótipo de fármaco anti-hipertensivo. Estudos farmacocinéticos identificaram dois metabólitos no soro de cães. Este trabalho objetivou a preparação in vitro destes metabólitos com utilização de fungos filamentosos. Metodologia: Os microrganismos Aspergillus alliaceus NRRL 315, Beauveria bassiana ATCC 7159, Cunninghamella echinulata ATCC 9244, Mortierela isabelina NRRL 1757 e Muccor plumbeus ATCC4740 foram selecionados como biocatalisadores. Após o término da reação, purificação em cromatografia de coluna, monitorada por HPLC-UV, e placa preparativa foi realizada. Várias condições de purificação foram testadas de modo a promover maior rendimento. Resultados e discussões: Beauveria bassiana ATCC 7159 e Cunninghamella echinulata ATCC 9244 foram as cepas mais promissoras, produzindo maior quantidade dos metabólitos desejados, o que pode ser observado por HPLC-UV. Dificuldades na purificação a impediram a completa elucidação estrutural dos metabólitos por Ressonância Magnética Nuclear (RMN) devido a pequena quantidade obtida. Conclusão: Os fungos filamentosos mimetizam a produção dos metabólitos de mamíferos do LASSBio 897, entretanto os métodos cromatográficos clássicos não são eficientes para total purificação dos metabólitos do meio reacional. Novas metodologias de purificação precisam ser desenvolvidas.